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致癌黃曲霉素
作者:管理員    發布于:2017-05-24 18:57:34    文字:【】【】【
黃曲霉毒素(AFT)是一類化學結構類似的化合物,均為二氫呋喃香豆素的衍生物。黃曲霉毒素是主要由黃曲霉 (aspergillus flavus)寄生曲霉 (a.parasiticus)產生的次生代謝產物,在濕熱地區食品和飼料中出現黃曲霉毒素的機率最高。
它們存在于土壤、動植物、各種堅果中,特別是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麥等糧油產品,是霉菌毒素中毒性最大、對人類健康危害極為突出的一類霉菌毒素[1]  。
中文名
黃曲霉毒素
外文名
AFT
化學結構
C17H12O6
毒    性
極強
特    性
G1,G2發綠色熒光
分    布
土壤,動植物各種堅果

發現歷史

20世紀60年代在英國發生的十萬只火雞突發性死亡事件被確認與從巴西進口的花生粕有關.進一步的
黃曲霉毒素B1黃曲霉毒素B1
調研證明,這些花生粕被一種來自真菌的有毒物質污染這些研究工作最終使人們發現了黃曲霉(Aspergillus.flavus)產生的有毒代謝物質。黃曲霉毒素(Aflatoxins).是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產物。特曲霉也能產生黃曲霉毒素,但產量較少.產生的黃曲霉毒素主要有B1,B2,G1,G2 以及另外兩種代謝產物M1,M2.其中M1 和M2是從牛奶中分離出來的.B1,B2,G1,G2,M1 和 M2 在分子結構上十分接近.。
1960年,英國發現有10萬只火雞死于一種以前沒見過的病,被稱為“火雞X病”,再后來鴨子也被波及。追根溯源,最大的嫌疑是飼料。這些可憐的火雞和鴨子吃的是花生餅?;ㄉ炇腔ㄉビ椭笫O碌臍堅?,富含蛋白質,是很好的禽畜飼料。
科學家們很快從花生餅中找到了罪魁禍首,一種真菌產生的毒素。它被命名為“aflatoxin ”。自那以后,黃曲霉毒素就獲得了科學家們的特別關照,對它的研究可能是所有的真菌毒素中最深入最廣泛的。
發現的黃曲霉素有十幾種。蒙牛介紹給公眾的“黃曲霉毒素M1”主要出現在各種奶中。M就是“奶”的意思。它還有一個兄弟M2。
其實M1和M2并不是黃曲霉菌產生的,毒性也并不是最強。毒性最強的排行“B1”,B表示藍色,因為它在紫外光的照射下會發出藍色熒光。除了親兄弟B2之外,它還有堂兄弟G1和G2,因為在紫外光下發射黃綠色熒光而得名。
B1 、B2和G1、G2,就是經常經常出現在農產品中的黃曲霉毒素的代表。B1和B2被奶牛吃了之后,分別有一小部分會轉化為M1和M2進入奶中。這就是牛奶中黃曲霉毒素的來源。
黃曲霉毒素在農產品中幾乎無法避免,不想餓死的人類也只好無奈地吃下一些。世界各國,都只能設定一個“限量標準”。不超過那個標準,危害就小到可以忽略了。
花生和玉米是最容易被黃曲霉污染的糧食。這也就是那10萬只可憐的火雞被害的原因?;蛟S會有敏感的讀者想到:既然那些花生被污染了,那么它們榨的油呢?
1966年,就有一篇科學論文探索過這個問題。研究者找了一批嚴重發霉的花生,其中的黃曲霉毒素B1已經超標到不可思議的地步。食物中的黃曲霉毒素用ppb為單位,1ppb相當于1噸糧食中含有1毫克。中國的現行標準是花生中不超過20ppb,而那批花生中的含量是5500ppb,無異于毒藥了。作者用有機溶劑浸取的方法來得到油,發現油中的B1含量是120ppb,雖然比原料中要低得多,但仍然大大高于安全標準?;ㄉ炛械暮縿t高達11000ppb,如果拿去喂動物,動物就只能追隨那批可憐的火雞了。
按照工業加工的流程,浸取出來的“粗油”要經過幾步精煉。經過了第一步精煉,B1含量降到了10ppb,已經達到食用標準。再經過第二步精煉,含量就低于1ppb,可以忽略了。
在中國還有很多榨油作坊。壓榨出來的油又如何呢?那位研究者也用這批花生進行了壓榨,結果是油中的B1超過了800ppb。這么高的原因在于,壓榨出的油中會帶入一些殘渣,而殘渣中的黃曲霉毒素含量非常高。同樣地,經過兩步精煉,油中的黃曲霉毒素基本上會被除去。
通常的花生當然不可能發霉到這種地步。不過在糧食發生肉眼可見的霉變之前,其中的黃曲霉毒素也可能達到危險的含量。從安全的角度,經過精煉的油是要更加優越的。如果實在喜歡“自己榨”的粗油,應該盡量使用收割之后及時干燥、而且保存良好的花生或者其他油料作物。否則,油中含有的黃曲霉毒素B1,無論是毒性還是含量,都比蒙牛超標牛奶中的M1要高得多了。
許多人都知道糧食收割之后受潮長霉會產生黃曲霉毒素。其實,黃曲霉毒素在農作物正常的生長期中就可以形成。比如玉米,土壤中的黃曲霉“種子”會在玉米棒中“萌發”。如果那段時間干燥而且高溫,黃曲霉毒素的含量就會明顯升高。此外,種植太密、野草太多、氮肥不足、蟲等因素,也有利于黃曲霉毒素的形成。美國曾經連續幾年跟蹤過中部一些州的玉米。發現1988年,那些州的玉米中黃曲霉毒素普遍很高。在有些農場的抽檢樣品中,超過食用標準20ppb的比例甚至高達36%。
農業生產中,黃曲霉毒素超標的玉米并不少見。如果全部銷毀,將會是很大的損失??茖W家們也找到了一些使用它們的合理方式。比如可以與不超標的混合,把總的含量降到比較低。這樣的做法不能用于人的食物,但對于禽畜飼料是可以接受的。如果超標不是很多,也可以喂給成年的豬、牛、雞等,黃曲霉素很難殘留在肉中。此外,釀酒也是一種出路。經過蒸餾,黃曲霉毒素無法進入酒中。只是,剩下的酒糟中含有很多毒素,也就不能用來做飼料了。

基本認識

1993年黃曲霉毒素被世界衛生組織(WHO)的癌癥研究機構劃定為1類致癌物,是一種毒性極強的劇毒物質.黃曲霉毒素的危害性在于對人及動物肝臟組織有破壞作用,嚴重時可導致肝癌甚至死亡.在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見,其毒性和致癌性也最強.
B1是最危險的致癌物,經常在玉米,花生,棉花種子,一些干果中常能檢測到。它們在紫外線照射下能產生熒光,根據熒光顏色不同,將其分為B族和G族兩大類及其衍生物。AFT已發現20余種。AFT主要污染糧油食品、動植物食品等;如花生、玉米,大米、小麥、豆類、堅果類、肉類、乳及乳制品、水產品等均有黃曲霉毒素污染。

化學結構

黃曲霉毒素(Aflatoxins)CAS號 1402-68-2,是一組化學結構類似的化合物,已分離鑒定出12
黃曲霉毒素B2黃曲霉毒素B2
種包括B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇.黃曲霉毒素的的基本結構為二呋喃環和香豆素,B1是二氫呋喃氧雜萘鄰酮的衍生物.即含有一個雙呋喃環和一個氧雜萘鄰酮(香豆素).前者為基本毒性結構后者與致癌有關.M1是黃曲霉毒素B1在體內經過羥化而衍生成的代謝產物.黃曲霉毒素的主要分子型式含 B1,B2,G1,G2,M1,M2等.其中M1和M2 主要存在于牛奶中.B1為毒性及致癌性最強的物質.
《黃曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1,M2化學結構式》
黃曲霉毒素B1(CAS號1162-65-8);
分子式:C17H12O6
分子量:312.27
黃曲霉毒素G1黃曲霉毒素G1
黃曲霉毒素B2(CAS號7220-81-7);
黃曲霉毒素G1(CAS號1165-39-5);
黃曲霉毒素 G2(CAS號7241-98-7);
黃曲霉毒素M1(CAS號6795-23-9)
黃曲霉毒素M2

物質特點

物化特性

紫外線下黃曲霉毒素B1,B2發藍色熒光黃曲霉毒素G1,G2
黃曲霉毒素G2黃曲霉毒素G2
發綠色熒光.黃曲霉毒素的相對分子量為312-346.難溶于水易溶于油,甲醇丙酮和氯仿等有機溶劑,但不溶于石油醚己烷和乙醚中.一般在中性溶液中較穩定,但在強酸性溶液中稍有分解在pH9-10的強堿溶液中分解迅速.其純品為無色結晶,耐高溫黃曲霉毒素B1的分解溫度為268℃紫外線對低濃度黃曲霉毒素有一定的破壞性.

毒性極強

對健康的危害黃曲霉毒素進入體內后,主要在肝細胞內質網微粒體混合功能氧化酶系的作用下進行代謝。黃曲霉毒素沒有經過代謝活化是無致癌性的,因曲昔曲霍毒素袖稱為前致癌物[1]  
遠遠高于氰化物、砷化物和有機農藥的毒性,其中以B1毒性最大。當人攝入量大時,可發生急性中毒,出現急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續攝入,可造成慢性中毒,生長障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生。AFT的致癌力也居首位,是目前已知最強致癌物之一。

檢測試劑

操作步驟
1.將所需試劑從微孔板中取出,放置室溫(20~25℃)30min以上,液體試劑使用前均須搖勻。
2.取出所需數量的微孔板,將不用的微孔板與干燥劑一起重新真空密封,保存于2~8℃。不要冷凍。
3.洗滌工作液在使用前也需回溫。 [2] 
4.將樣本和標準品對應微孔編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5.加標準品/樣本50ml到對應的微孔中,加入酶標物50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環境中反應30min。
6.小心揭開蓋板膜,用洗滌工作液充分洗滌300ml/孔,洗板5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干。
7.加入顯色液100ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環境反應30min。
8.加終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設酶標儀于450nm處讀每孔OD值。
注意事項
1.室溫低于20℃或試劑及樣本沒有恢復到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2.在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3.每種試劑使用前均需搖勻。
4.反應終止液為2M鹽酸,避免接觸皮膚。
5.不要使用過了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6.儲存條件
7.試劑變質的跡象:顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質,應當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。
8.加入顯色液后,一般顯色時間為15~30min。若顏色較淺,可延長反應時間到35min(或更長),但不得超過40min。反之,則減短反應時間。
9.該試劑盒最佳反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
試劑盒保存于2~8℃,不要冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標準物質和無色的顯色劑對光敏感,因此要避光保存。
黃曲霉毒素毒性比砒霜大68倍
黃曲霉毒素被世界衛生組織劃定為1類致癌物,毒性比砒霜大68倍,僅次于肉毒霉素,是目前已知霉菌中毒性最強的。據悉,黃曲霉毒素的危害性在于對人及動物 肝臟組織有破壞作用,嚴重時可導致肝癌甚至死亡,在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見,其毒性和致癌性也最強?!癇1是最危險的致癌物,經常在玉米,花生,棉花種子,一些干果中常能檢測到,其中以花生和玉米污染最嚴重。家庭自制發酵食品也能檢出黃曲霉毒素,尤其是高溫高濕地區的糧油及制品種檢出率更高?!币幻嚓P人員介紹說。[3] 
具耐熱性
一般烹調加工溫度不能將其破壞,裂解溫度為280℃。在水中溶解度較低,溶于油及一些有機溶劑,如氯仿和甲醇中,但不溶于乙醚、石油醚及乙烷。

臨床特征

食品中所污染的主要是黃曲霉毒素B1,其毒性一般認為有三種臨床特征;急性中毒、慢性中毒和致癌性:
(1)急性中毒:
它是一種劇毒物質,毒性比KCN大10倍,比砒霜大68倍,僅次肉毒霉素,是目前已知霉菌中毒性最強的。它的毒害作用,無論對任何動物,主要變化是肝臟,呈急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。脾臟和胰臟也有輕度的病變。
(2)慢性中毒:
長期攝入小劑量的黃曲霉毒素則造成慢性中毒。其主要變化特征為肝臟出現慢性損傷,如肝實質細胞變性、肝硬化等。出現動物生長發育遲緩,體重減輕,母畜不孕或產仔少等系列癥狀。
(3)致癌性
AFT是目前所知致癌性最強的化學物質
其致癌特點是:
A 致癌范圍廣,能誘發魚類
黃曲霉毒素M1黃曲霉毒素M1
、禽類,各種實驗動物、家畜及靈長類等多種動物的實驗腫瘤;
B 致癌強度大,其致癌能力比六六六大1萬倍;
C 可誘發多種癌,AFT主要誘發肝癌,還可誘發胃癌、腎癌、淚腺癌、直腸癌、乳腺癌,卵巢及小腸等部位的腫瘤,還可出現畸胎。

主要來源

黃曲霉毒素是黃曲霉、寄生曲霉等產生的代謝產物。當糧食未能及時曬干及儲藏不當時,往往容易被黃曲霉或寄生曲霉污染而產生此類毒素。

分布特點

黃曲霉毒素存在于土壤,動植物各種堅果,特別是
黃曲霉毒素M2黃曲霉毒素M2
花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經常發現黃曲霉毒素。一般在熱帶和亞熱帶地區,食品中黃曲霉毒素的檢出率比較高。在中國,產生黃曲霉毒素的產毒菌種主要為黃曲霉。1980年測定了從17個省糧食中分離的黃曲霉1660株,廣西地區的產毒黃曲霉最多檢出率為58%??偟姆植记闆r為:華中、華南、華北產毒株多,產毒量也大;東北、西北地區較少。

產菌及產毒條件

黃曲霉毒素的產生菌及產毒條件能夠產生黃曲霉毒素的最主要的菌種是黃曲霉和寄生曲霉,此外曲霉屬的黑曲霉、灰綠曲霉、赭曲霉等,青霉屬的桔青霉、擴展青霉、指狀青霉等,毛霉,鐮孢霉,根霉,鏈霉菌等也能產生黃曲霉毒素。它們產生黃曲霉毒素的條件如下:基質、溫度、pH、相對濕度[1] 

物質代謝

分布與排泄
黃曲霉毒素進入機體后,在肝臟中的量較其他組織器官為高,說明肝臟可能受黃曲霉毒素的影響最大。腎臟、脾臟腎上腺也可檢出,肌肉中一般不能檢出。黃曲霉毒素如不連續攝入,一般不在體內積蓄。一次攝入后約1周即經呼吸、尿、等將大部分排出。
AFB1在動物體內經細胞內質網微粒體混合功能氧化酶系代謝,在微粒體混合功能氧化酶系的作用下AFB1發生脫甲基、羥化及環氧化反應主要代謝產物為AFM1.AFP1.AFQ1和AFB1-2,3-環氧化物。

造成危害

概述
黃曲霉毒素對人和動物健康的危害均與黃曲霉毒素抑制蛋白質的合成有關.黃曲霉毒素分子中的雙呋喃環結構是產生毒性的重要結構.研究表明,黃曲霉毒素的細胞毒作用是干擾信息RNA和DNA的合成,進而干擾細胞蛋白質的合成導致動物全身性損害(Nibbelink,1988).黃光琪等(1993)研究指出黃曲霉毒素B1能與tRNA結合形成加成物,黃曲霉毒素-tRNA加成物能抑制tRNA與某些氨基酸結合的活性對蛋白質生物合成中的必需氨基酸,如賴氨酸亮氨酸,精氨酸和甘氨酸與tRNA的結合均有不同的抑制作用,從而在翻譯水平上干擾了蛋白質生物合成影響細胞代謝..
黃曲霉毒素與動物疾病
黃曲霉毒素中毒(Aflatoxicosis)主要對動物肝臟的傷害,受傷害的個體因動物種類年齡,性別和營養狀態而異.研究結果表明黃曲霉毒素可導致功能下降,降低牛奶產量和產蛋率.并使動物的免疫力降低易受有害微生物的感染.此外,長期食用含低濃度黃曲霉毒素的飼料也可導致胚胎內中毒.通常年幼的動物對黃曲霉毒素更敏感.黃曲霉毒素的臨床表現為消化系統功能紊亂降低生育能力.降低飼料利用率,貧血等.黃曲霉毒素不僅能夠使奶牛的產奶量下降而且還使牛奶中含有轉型的黃曲霉毒素M1和M2.據美國農業經濟學家統計,由于食用黃曲霉毒素污染的飼料每年至少要使美國畜牧業遭受10%的經濟損失.在中國,由此而帶來的畜牧業損失可能會更大.黃曲霉毒素能導致家禽法氏囊和胸腺萎縮,皮下出血,反應差,抵抗力下降,疫苗失效,度疫病感受性提高,蛋變小,蛋黃重量變低,受精率、孵化率降低,胚胎死亡增加及不健康,。對家畜引起生長緩慢,飼料率下降,黃疸,皮毛粗糙,低蛋白血癥,肝癌和免疫抑制
黃曲霉毒素與人類的健康
人類健康受黃曲霉毒素的危害主要是由于人們食用被黃曲霉毒素污染的食物.對于這一污染的預防是非常困難的其原因是由于真菌食物食品原料中的存在是很普遍的.國家衛生部門禁止企業使用被嚴重污染的糧食進行食品加工生產,并制定相關的標準監督企業執行.但對于含黃曲霉毒素濃度較低的糧食和食品無法進行控制.在發展中國家食用被黃曲霉毒素污染的食物與癌癥的發病率呈正相關性.亞洲和非洲的疾病研究機構的研究工作表明,食物中黃曲霉毒素與肝細胞癌變 (Liver Cell Cancer,LCC) 呈正相關性.長時間食用含低濃度黃曲霉毒素的食物被認為是導致肝癌胃癌,腸癌等疾病的主要原因.1988年國際腫瘤研究機構(International Agency for Research on Cancer,IARC) 將黃曲霉毒素B1列為人類致癌物.除此以外黃曲霉毒素與其它致病因素(如肝炎病毒)等對人類疾病的誘發具有疊加效應.
黃曲霉毒素Bl的半數致死量為0.36毫克/公斤體重,屬特劇毒的毒物范圍(動物半數致死量<10毫克/公斤=它的毒性比氰化鉀大10倍比砒霜大68倍).它引起人的中毒主要是損害肝臟,發生肝炎肝硬化,肝壞死等.臨床表現有胃部不適食欲減退,惡心嘔吐,腹脹及肝區觸痛等;嚴重者出現水腫昏迷,以至抽搐而死.黃曲霉毒素是目前發現的最強的致癌物質.其致癌力是奶油黃的900倍比二甲基亞硝胺誘發肝癌的能力大75倍,比3,4苯并芘大4000倍.它主要誘使動物發生肝癌也能誘發胃癌,腎癌直腸癌及乳腺,卵巢小腸等部位的癌癥.

檢驗檢疫

國家要求

● 1995年,世界衛生組織制定的食品黃曲霉毒素最高允許濃度為15ug/kg.
● 中國政府對各種食物中黃曲霉毒素的最高允許量見表2.
表2 中國對食品中黃曲霉毒素的最高允許含量
食 物 名 稱
最高允許含量/(ug/kg)
玉米花生,花生油,堅果和干果(核桃杏仁)
20(黃曲霉毒素B1)
玉米,花生仁制品(按原料折算)
20(黃曲霉毒素B1)
大米其他食用油(香油,菜籽油大豆油,葵花油胡麻油,茶油麻油,玉米胚芽油米糠油,棉籽油)
10(黃曲霉毒素B1)
其他糧食(麥類面粉,薯干),發酵食品(醬油食用醋,豆豉腐乳制品),淀粉類制品(糕點餅干,面包裱花蛋糕)
5(黃曲霉毒素B1)
牛乳及其制品(消毒牛奶,新鮮生牛乳全脂牛奶粉,淡煉乳,甜煉乳奶油,黃油)新鮮豬組織(肝,腎血,瘦肉)
0.5(黃曲霉毒素M1)
 美國聯邦政府有關法律規定人類消費食品和奶牛飼料中的黃曲霉毒含量(指B1+B2+G1+G2的總量)不能超過15μg/kg.人類消費的牛奶中的含量不能超過0.5μg/kg,其他動物飼料中的含量不能300μg/kg。
● 而歐盟國家規定更加嚴格落花生和堅果及其加工產品和所有谷類食品及加工產品中黃曲霉毒素B1限量為2.0μg/kg;原奶、熱處理奶及加工奶產品中M1限量為0.050μg/kg;嬰兒食品(包括嬰幼兒奶)中M1限量為0.025μg/kg?!?/div>

通用方法

薄膜層析法和液相色譜法是目前國內絕大多數檢測機構都在使用的方法。由于其檢測周期長,程序復雜所需試劑繁多等缺點已遠遠不能滿足現代檢測要求.隨著現代科學技術的不斷發展,特別是免疫學生物化學,分子生物學的不斷發展人們已創建了不少快速,簡便特異,敏感低耗且適用的黃曲霉毒素檢測方法.而且以金標試紙為代表的這些方法已經被先進國家所廣泛使用,引進和消化這些先進的方法是我們檢測領域的當務之急.免疫親和柱法優點很多但由于檢測費用過高,而無法普及.而一步式黃曲霉毒素檢測金標試紙法似乎更適用于中國值得推廣。

其余方法

1、薄層層析
薄層層析(Thin-Layer Chromatography,TLC)是在黃曲霉毒素研究方面應用最廣的分離技術.自1990年它被列為AOAC (Association of Official Agricultural Chemists)標準方法,該方法同時具有定性和定量分析黃曲霉毒素的功能.
2、液相色譜法
液相色譜(Liquid Chromatography,LC)與薄層層析在許多方面具有相似性二者互相補充.通常用TLC進行前期的條件設定,選擇適宜的分離條件后再用LC進行黃曲霉毒素的定量測定。
3、免疫化學分析方法
利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設計的黃曲霉毒素的免疫分析方法也是最常用的黃曲霉毒素檢測方法.這類方法通常包括放射免疫分析方法(Radioimmunoassay,RIA),酶聯免疫法(Enzyme-linked of Immunosorbent Assay,ELISA)和免疫層析法(Immunoaflinity Column Assay,ICA).它們均可以對黃曲霉毒素進行定量測定。
(1) 免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術-HPLC法
免疫親和柱法和酶聯免疫吸附法雖然都可達到速簡便效果但酶聯免疫吸附法僅能檢測單一毒素(如黃曲霉毒素B1)含量,而且易出現假陽性結果難以控制.免疫親和柱法(包括熒光光度法和HPLC法)卻能達到既定量準確又快速簡便的要求。
免疫親和柱的使用可以避免傳統TLC和HPLC的缺點,同時免疫親和柱與TLC和HPLC法結合可以大大提高工作效率提高靈敏度和準確度。
黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計法是以單克隆免疫親和柱為分離手段,用熒光計紫外燈作為檢測工具的快速分析方法。它克服了TLC和HPLC法在操作過程中使用劇毒的真菌毒素作為標定標準物和在樣品預處理過程中使用多種有毒,異味的有機溶劑毒害操作人員和污染環境的缺點.同時黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計法分析速度快,一個樣品只需10-15min,比傳統方法快幾個小時甚至幾天時間;儀器設備輕便容易攜帶自動化程度高,操作簡單直接讀出測試結果,可以在小型實驗或現場使用.可以進行黃曲霉毒素總量 (B1B2G1G2) 的測定檢測限可達到1ug/kg,達到黃曲霉毒素標準限量值以下測定范圍為1-300ug/kg。
黃曲霉毒素免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統的HPLC法更加安全可靠,靈敏度和準確度高。它采用單克隆抗體免疫技術可以特效性地將黃曲霉毒素或其他真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高。
分析原理試樣中的黃曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液經過過濾稀釋后,用免疫親和柱凈化以甲醇將親和柱上的黃曲霉毒素淋洗下來,在淋洗液中加入溴溶液衍生以提高測定靈敏度,然后用熒光分光光度計進行定量。也可以將甲醇-黃曲霉毒素淋洗液的一部分注入HPLC中對黃曲霉毒素B1,B2,G1,B2分別進行定量分析.免疫親和柱是用大劑量的黃曲霉毒素單克隆抗體固化在水不溶性的載體上然后裝柱而成.該方法的測定范圍0-300ug/kg。
(2) 酶聯免疫吸附法:
1996年,Nakane 建立了辣根過氧化物酶標記抗體的測定技術.由于該方法簡便敏感,特異可作為多種抗原或抗體的測定,20世紀70年代后期該方法引入真菌毒素的檢測中,下面介紹的是競爭性酶聯免疫吸附間接法檢測黃曲霉毒素B1。
原理:將已知抗原吸附在固態載體表面洗除末吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品(含有抗原)提取液的混合液競爭培養后,在固相載體表面形成抗原抗體復合物.洗除多余抗體成分然后加入酶標記的抗球蛋白的第二抗體結合物,與吸附在固體表面的抗原抗體結合物相結合再加入酶底物。在酶的催化作用下,底物發生降解反應產生有色物質,通過酶標檢測儀測出酶底物的降解量從而推知被測樣品中的抗原量。
(3) 微柱篩選法
可以用來半定量測定各種食品中黃曲霉毒素B1,B2,G1,G2的總量。
原理 樣品提取液中的黃曲霉毒素被微柱管風硅鎂型吸附層吸附后在波長365nm紫外光燈下顯示藍紫色熒光環,其熒光強度與黃曲霉毒素在一定的光密度范圍內成正比例關系.若硅鎂型吸附劑層未出現藍紫色熒光則樣品為陰性(方法靈敏度為5-10ug/kg).由于在微柱上不能分離黃曲霉毒素B1,B2,G1,G2,所以測得結果為總的黃曲霉毒素含量。
(4) 一步式黃曲霉毒素檢測金標試紙法
一步式黃曲霉毒素檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法。由此產生的一步式黃曲霉毒素快速檢測試紙可在5—10分鐘完成對樣品中黃曲霉毒素的定性測定.借助黃曲霉毒素標準樣品這種方法能估算黃曲霉毒素的含量,非常適用于現場測試和進行大量樣品的初選。

抵抗方法

著名醫學雜志Carcinogenesis在2007年刊登了一項研究,其中發現天然葉綠素可以抑制黃曲霉毒素B1引起的大鼠多器官致癌作用。研究者表示,葉綠素的抗癌機制可能是因為它能大幅度減少黃曲霉毒素的吸收率,從而抑制了黃曲霉毒素對肝臟DNA的加成作用。他們認為,葉綠素是一種極好的化學保護物質,對抗致癌物的作用非常有效,從減少吸收,到減少致癌物與遺傳物質的作用,直到減少各組織的癌前病變出現,各環節都有明顯的效果。
當然,這只是一項動物研究,對人體來說,葉綠素是不是也有同樣的作用呢?在大鼠試驗的啟發下,2009年的Cancer Prevention Research雜志上發表了一項人體試驗研究,它證明,在人類志愿者當中,葉綠素一樣能夠有效地對抗黃曲霉毒素的致癌作用。研究者們給志愿者服用微量14C標記的黃曲霉毒素B1膠囊,然后正常進食和飲水,測定他們在72小時之內對黃曲霉毒素的吸收和代謝情況。過若干天后,給志愿者同樣服用這種黃曲霉毒素膠囊,但再加上葉綠素或者葉綠酸。結果和大鼠試驗相當類似,葉綠素和葉綠酸能大大降低黃曲霉毒素的吸收率。

快速辨別

黃曲霉素是很苦的,食用花生、核桃等食物時如果感覺很苦,馬上吐出來,并漱口。發霉的花生、核桃等都容易產生黃曲霉素。[4] 

預防措施

防霉霉菌生長繁殖需要一定的溫度、濕度、氧氣及水分含量,如能控制這些因素的其中之一,即可達到防霉的目的;去毒對黃曲霉毒素;含量超過國家標準規定的糧油食品必須進行去毒處理。目前常用的去毒方法有物理去除法、化學去除法和生物去除法:a物理去除b化學去除法c生物學脫毒方法[1]  。

超標事件

2011年12月24日,國家質量監督檢驗檢疫總局公布了對全國液體乳產品進行抽檢結果的公告,蒙牛乳業(眉山)有限公司生產的一批次產品被檢出黃曲霉毒素M1超標140%。
此次涉事的四川眉山工廠在2008年4月全面啟動,其一期項目總投資3億元,設計能力為日處理鮮奶800噸。
此事發生后,蒙牛在25日凌晨及晚上9點鐘兩次連發道歉聲明。
2011年12月26日,蒙牛副總裁盧建軍解釋稱,“黃曲霉素是因為眉山地處四川,多陰雨天氣,個別供方對飼料管理不當,霉變導致牛奶產生黃曲霉素?!?/div>
2011年12月27日在植物油產品中, 廣東省有3個產品的部分批次抽檢不及格,分別是云浮市云城區滿意花生油廠的花生油(壓榨)、云城區富盛糧油廠的花生油(壓榨)和高要市孖寶油有限公司的花生油(2.73L/瓶),原因均為黃曲霉毒素B1指標不合格。
[5] 
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